青青久久精品国产免费看,大伊香蕉精品视频在线不卡,日本韩国精品一区二区三区,国产丝袜按摩女技师在线

當前位置:
首頁 > 產品中心 > 酶聯免疫試劑盒(種屬) > 其它ELISA試劑盒 > 線粒體復合體Ⅳ試劑盒說明書
產品展示Products
線粒體復合體Ⅳ試劑盒說明書
線粒體復合體Ⅳ試劑盒說明書
更新時間:2025-01-14
型    號:
所屬分類:其它ELISA試劑盒
報    價:
分享到:

線粒體復合體Ⅳ試劑盒還原型細胞色素C在550nm有特征光吸收,線粒體復合體Ⅳ催化還原型細胞色素C生成氧化型細胞色素C,因此550nm光吸收下降速率能夠反映線粒體復合體Ⅳ酶活性。

線粒體復合體Ⅳ試劑盒說明書產品概述:

貨號:YJ1172                                                   規格:100管/96樣

線粒體復合體Ⅳ試劑盒說明書

微量法

正式測定前務必取 2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義:

線粒體復合體Ⅳ又稱細胞色素C氧化酶,也是線粒體呼吸電子傳遞鏈主路和支路的共有成分,負責催化還原型細胞色素C的氧化,并終把電子傳遞給氧,生成水。

線粒體復合體Ⅳ試劑盒測定原理:

還原型細胞色素C在550nm有特征光吸收,線粒體復合體Ⅳ催化還原型細胞色素C生成氧化型細胞色素C,因此550nm光吸收下降速率能夠反映線粒體復合體Ⅳ酶活性。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、研缽、冰和蒸餾水。

線粒體復合體Ⅳ試劑盒組成和配制:

試劑一:液體 100mL×1 瓶,-20℃保存;

試劑二:液體 20mL×1 瓶,-20℃保存;

試劑三:液體 1.5mL×1 瓶,-20℃保存;

試劑四:液體 20mL×1 瓶,4℃保存;

試劑五:粉劑×1 支,-20℃保存;

試劑六:粉劑×1 支,-20℃保存;

樣本的前處理:

組織、細菌或細胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離:

1、準確稱取0.1g組織或收集500萬細胞,加入1mL試劑一和10uL試劑三,用冰浴勻漿器或研缽勻漿。

2、將勻漿 600g,4℃離心 5min。

3、棄沉淀,將上清液移至另一離心管中,11100g,4℃離心 10min。

4、上清液即為除去線粒體的胞漿蛋白,可用于測定從線粒體泄漏的復合體Ⅳ(此步可選做)。

5、步驟④中的沉淀即為線粒體,加入200uL試劑二和2uL試劑三,超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10秒,重復30次),用于復合體Ⅳ酶活性測定。

測定步驟:

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長至550nm,蒸餾水調零。

2、樣本測定

(1)工作液的配制:臨用前將試劑五和試劑六依次轉移到試劑四中混合溶解,置于37℃(哺

乳動物)或 25℃(其它物種)孵育5min;用不完的試劑 4℃可保存一周;

(2)在微量石英比色皿或96孔板中加入10μL樣本和200μL工作液,混勻,立即記錄550nm

處初始吸光值 A1 和 1min 后的吸光值 A2,計算 ΔA=A1-A2。

注意點: 若 ΔA 大于0.2,需將樣本用試劑二稀釋適當倍數(計算公式中乘以相應稀釋倍數),

使 A1-A2 小于 0.2,可提高檢測靈敏度。

復合體Ⅳ活力單位的計算:

a.使用微量石英比色皿測定的計算公式如下:

(1) 按樣本蛋白濃度計算

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘催化降解1nmol還原型細胞色素C定義為一個酶活力單位。

復合體Ⅳ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T

=1099×ΔA÷Cpr

此法需要自行測定樣本蛋白質濃度。

(2) 按樣本鮮重計算

單位的定義:每g組織每分鐘催化降解1nmol還原型細胞色素C定義為一個酶活力單位。

復合體Ⅳ活力 (nmol/min/g 鮮重)=[ΔA×V反總÷(ε×d )×109]÷(W×V樣÷V樣總)÷T=222×ΔA÷W

(3) 按細菌或細胞密度計算

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘催化降解1nmol還原型細胞色素C定義為一個酶活力單位。

復合體Ⅳ活力(nmol/min/104cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(500×V樣÷V樣總)÷T=0.444×ΔA

V 反總:反應體系總體積,2.1×10 -4 L;ε:細胞色素 C 摩爾消光系數,1.91×104 L/ mol /cm;d:比色皿光徑,1cm;V 樣:加入樣本體積,0.01 mL;V 樣總:加入提取液體積,0.202 mL;T:反應時間,1 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;500:細胞或細菌總數,500 萬。

b.使用 96 孔板測定的計算公式如下:

(1) 按樣本蛋白濃度計算

單位的定義:每mg組織蛋白每分鐘催化降解1nmol還原型細胞色素C定義為一個酶活力單位。

復合體Ⅳ活力(nmol/min/mg prot)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(V 樣×Cpr) ÷T

=2198×ΔA÷Cpr

此法需要自行測定樣本蛋白質濃度。

(2) 按樣本鮮重計算

單位的定義:每g組織每分鐘催化降解1nmol還原型細胞色素C定義為一個酶活力單位。

復合體Ⅳ活力 (nmol/min/g 鮮重 )=[ΔA×V反總÷(ε×d )×109]÷(W×V樣 ÷V樣總)÷T=444×ΔA÷W

(3) 按細菌或細胞密度計算

單位的定義:每1萬個細菌或細胞每分鐘催化降解1nmol還原型細胞色素C定義為一個酶活力單位。

復合體Ⅳ活力(nmol/min/104cell)=[ΔA×V反總÷(ε×d)×109]÷(500×V樣÷V樣總)÷T=0.888×ΔA

V 反總:反應體系總體積,2.1×10 -4 L;ε:細胞色素 C 摩爾消光系數,1.91×104 L/mol/cm;d:96 孔板光徑,0.5cm;V 樣:加入樣本體積,0.01 mL;V 樣總:加入提取液體積,0.202mL;T:反應時間,1 min;Cpr:樣本蛋白質濃度,mg/mL;W:樣本質量,g;500:細胞或細菌總數,500 萬。

 

非洲豬瘟病毒抗原膠體金測試卡

慶大霉素快速檢測試紙條(檢尿樣消線法)

留言框

  • 產品:

  • 您的單位:

  • 您的姓名:

  • 聯系電話:

  • 常用郵箱:

  • 省份:

  • 詳細地址:

  • 補充說明:

  • 驗證碼:

    請輸入計算結果(填寫阿拉伯數字),如:三加四=7

滬公網安備 31011802001678號

91久久香蕉国产熟女线看| 欧美日韩国产综合一区精| 亚洲人成777在线播放| 亚洲无码三级片浪潮AV| 精品欧美一区二区三区久| 日韩精品诱惑一区?区三区| 亚洲乱码中文字幕综合区 | 无码免费一区二区三区免费播放| 久久亚洲av成人出白浆| 国产在线v欧美在线TV| 欧美日韩国产区在线观看| 日韩久久成人av一区二区| 日韩高清在线观看视频一区| 操婷婷视频在线观看网站| 在线看片a免费人成视频| 日韩中文字幕亚洲精品欧美| 日韩精品系列电影在线观看| 国产精品网站免费在线观看| 91免费视视频在线观看| 精品九九99久久免费九九| 日本乱中文字幕在线观看| 国产日韩欧美一区二区四区| 一起草在线免费观看视频| 丰满五十六十老熟女在线| 欧美不卡视频在线免费观看| 亚洲欧美综合伊人看片综合| 亚洲欧美精品一区中文字幕| 8090电影网午夜日本| 国产欧美成人精品久久久久| 久久好色人妻五月天丁香| 青青草原亚洲| 人久人久人久污污污精品国产| 成人免费手机在线看网站| 免费观看亚洲黄色手机av| 人妻精品日韩一区二区三区| 亚洲一级毛片无码无遮挡| 在线成人亚洲中文字幕av| 日韩一区二区三区高清视频| 国自产拍偷拍精品啪啪一区二区| 欧美一区二区久久久久久| 亚洲桃花岛成人av入口|